Phim Lệnh Truy Nã Giang Hồ xoay quanh câu chuyện về ba anh em kết nghĩa, nhưng rồi lại trở mặt thành kẻ thù.
Long Bất Nhiễm (nhị ca) bị chi phối bởi lòng tham và sự ghen ghét, nên đã phản bội và giết hại gần như toàn bộ gia đình của Thẩm Nhất Diệp (đại ca). Trong lúc tuyệt vọng, Diệp Lương (tam đệ) quyết tâm chống trả và tìm cách giải cứu cháu gái còn sống sót của đại ca.
Với tinh thần quả cảm và ý chí kiên cường, Diệp Lương sử dụng tất cả sức mạnh và kỹ năng của mình để bảo vệ cháu gái trước những nguy hiểm đang bao vây xung quanh. Mọi hành động này đều xuất phát từ lời hứa mà anh từng nói với đại ca rằng: Nếu ngày mai có việc cần giúp đỡ, dù phải đối mặt với muôn ngàn khó khăn, tôi chắc chắn sẽ ở bên cạnh.
Cuối cùng, sau khi trải qua nhiều thử thách và vượt qua cái chết, Diệp Lương đã thực hiện được mong muốn của mình và kết thúc cuộc đời của Long Bất Nhiễm - kẻ đã gây ra biết bao đau khổ cho gia đình và bạn bè của anh. Qua đó, anh cũng đã giải quyết xong mọi mối quan hệ phức tạp và oan trái trong quá khứ.
